Introduction: currently, the most relevant applications of perinatal derivatives are in wound healing, for example, the use of amniotic membrane (AM) as a biomaterials source for use in different healing processes. The anastomotic healing compromised by antimetabolic drugs, such as 5-fluorouracil (5-FU), is a potential target of AM. Objective: To evaluate the healing effects of the AM use in rats treated with 5-FU at a dose of 20 mg/kg on the 7th postoperative day, regarding the parameters percentage of type I collagen (mature), cell viability, microvascular density and granulation tissue formation. Method: Thirty-two Wistar rats were submitted to colotomy and colorraphy, separated in 4 groups with 8t rats each and received, by 7 days, different treatments intraperitoneally, once daily from the operation day until sacrifice: 1- saline solution (C), 2- 20 mg/kg 5-FU, 3- 20 mg/kg 5-FU and 4- MA, and MA. Results: Tthe treatment with 5-FU (20 mg/kg – 7 days) induced adverse effects in the anastomotic healing process evidenced by the decrease of type I collagen (mature), cell viability, percentage microvascular density, granulation tissue formation (leukocyte-fibrin crust and angio-fibroblastic proliferation). The use of AM, under these conditions, induced an improvement in type I collagen (mature) percentage. Conclusion: The treatment with 5-FU induced adverse effects on the healing anastomotic process, and the use of AM, under these conditions, induced improvement in type I (mature) collagen percentage.

Introdução: Atualmente emerge em nosso meio aplicações mais relevantes dos derivados perinatais, por exemplo, a membrana amniótica (MA), como fonte de biomateriais para emprego em diferentes processos cicatriciais. O comprometimento anastomótico por drogas antimetabólicas como o 5-fluorouracil (5-FU) é um potencial alvo da MA. Objetivo: Avaliar os efeitos cicatriciais do uso da MA em ratos tratados com 5-FU na dose de 20 mg/kg ao 7º. dia de evolução pós-operatória quanto aos parâmetros porcentagem de colágeno tipo I (maduro), viabilidade celular, densidade microvascular e formação do tecido de granulação. Método: Utilizaram-se 32 ratos da linhagem Wistar submetidos à colotomia e colorrafia separados em 4 grupos com 8 e receberam diferentes tratamentos diariamente por via intraperitoneal até o dia do sacrifício: Solução fisiológica (C), 20  mg/kg 5-FU, 20 mg/kg 5-FU e MA, MA. Resultados: O tratamento com 20 mg/kg de 5-FU, ao 7º. dia pós-operatório induziu efeitos adversos no processo cicatricial anastomótico evidenciados pela diminuição da porcentagem de colágeno tipo I (maduro), da viabilidade celular, da densidade microvascular, da formação de crosta fibrinoleucocitária e da proliferação angiofibroblástica; o uso da MA nestas condições induziu melhora da porcentagem de colágeno tipo I (maduro). Conclusão: O tratamento com 20 mg/kg de 5-FU, ao 7º. dia pós-operatório induziu efeitos adversos no processo cicatricial anastomótico e o uso da MA nestas condições induziu melhora da porcentagem de colágeno tipo I (maduro).

RESUMO Objetivo: avaliar os efeitos da arginina na cicatrização da parede abdominal de ratos Wistar. Métodos: vinte ratos Wistar foram submetidos à laparotomia e separados em dois grupos (arginina e controle), que receberam tratamento diário por via intraperitoneal com arginina (300mg/kg/dia) e solução tampão fosfato em dose equivalente ao peso, respectivamente, durante cinco dias. No sétimo dia pós-operatório, coletaram-se amostras de sangue e da cicatriz da parede abdominal de ambos os grupos. Avaliaram-se o nível sérico de nitratos e nitritos, a evolução cicatricial pelas dosagens de hidroxiprolina tecidual, formação de tecido de granulação, determinação da porcentagem de colágeno maduro e imaturo, densidade de miofibroblastos e angiogênese. Empregaram-se os testes de ANOVA e t de Student com p=0,05 para as comparações entre os grupos. Resultados: não ocorreram diferenças significantes entre os grupos estudados para dosagens de nitratos e nitritos (p=0,9903), hidroxiprolina tecidual (p=0,1315) e densidade de miofibroblastos (p=0,0511). O grupo arginina apresentou maior densidade microvascular (p=0,0008), maior porcentagem de colágeno tipo I (p=0,0064) e melhora na formação do tecido de granulação, com melhores índices de proliferação angiofibroblástica (p=0,0007) e re-epitelização das bordas (p=0,0074). Conclusão: na avaliação cicatricial da parede abdominal de ratos Wistar sob tratamento com arginina, não houve alteração do nível sérico de nitratos e nitritos, da deposição de colágeno total e da densidade de miofibroblastos. Verificaram-se aumento da maturação de colágeno do tipo I, da densidade microvascular e melhora na formação do tecido de granulação cicatricial pelas melhores re-epitelização de bordas e proliferação angiofibroblástica.

ABSTRACT Objective: to evaluate the effects of arginine on abdominal wall healing in rats. Methods: we submitted 20 Wistar rats to laparotomy and divided them into two groups, arginine and control, which then received, respectively, daily intraperitoneal treatment with arginine (300mg/kg/day) and weight-equivalent phosphate buffered solution, during five days. On the seventh postoperative day, we collected blood and scar wall samples from both groups. We evaluated serum nitrate and nitrite levels, wound evolution by tissue hydroxyproline dosages, granulation tissue formation, percentage of mature and immature collagen, myofibroblast density and angiogenesis. We used the ANOVA and the Student’s t tests with p=0.05 for comparisons between groups. Results: there were no significant differences between the groups studied for nitrate and nitrite (p=0.9903), tissue hydroxyproline (p=0.1315) and myofibroblast density (p=0.0511). The arginine group presented higher microvascular density (p=0.0008), higher percentage of type I collagen (p=0.0064) and improved granulation tissue formation, with better angiofibroblastic proliferation rates (p=0.0007) and wound edge reepithelization (p=0.0074). Conclusion: in the abdominal wall healing evaluation of Wistar rats under arginine treatment, there was no change in serum nitrate and nitrite levels, total collagen deposition and myofibroblast density. There was an increase in type I collagen maturation, microvascular density and improvement in scar granulation tissue formation by better edge reepithelization and angiofibroblastic proliferation.

RESUMO Racional: A doença renal crônica atinge mais de 500 milhões de pessoas em todo o mundo. Neste contexto, as toxinas urêmicas estão relacionadas ao comprometimento da cicatrização tecidual. Objetivo: Avaliar, na cicatrização de anastomoses colônicas de ratos urêmicos indicadores séricos e anatomopatológicos que possam estar relacionados com alteração do processo de reparação tissular. Métodos: Utilizaram-se 20 ratos Wistar divididos aleatoriamente em dois grupos. No grupo simulação eles foram submetidos à simulação da nefrectomia 5/6 do rim esquerdo, simulação de nefrectomia total do rim direito, laparotomia mediana, colotomia e colorrafia. No grupo uremia, eles foram submetidos à nefrectomia 5/6 do rim esquerdo, nefrectomia total do rim direito, laparotomia mediana, colotomia e colorrafia. Coletaram-se amostras de sangue para dosagens séricas da ureia, creatinina e proteína C reativa, e do cólon para processamentos histológicos e histoquímicos na avaliação do tecido de granulação, maturação de colágeno, densidade microvascular e de miofibroblastos, viabilidade celular cicatricial. Empregou-se a histometria computadorizada para as avaliações de colágenos tipos I e III, densidade microvascular pela marcação com anticorpo monoclonal anti-CD34, viabilidade celular pela pesquisa do antígeno nuclear de proliferação celular e a densidade de miofibroblastos com anticorpo monoclonal anti-α-actina. Resultados: O grupo submetido à nefrectomia 5/6, em comparação ao grupo simulação, demonstraram aumentos da ureia sérica (p<0,0000) e proteína C reativa (p=0,0142), redução da formação de tecido de granulação (reepitelização de bordas p=0,0196, proliferação angiofibroblástica p=0,0379), porcentagens de colágeno I (p=0,0009) e colágeno III (p=0,016), densidade microvascular (p=0,0074) e miofibroblastos (p<0,0001) e antígeno nuclear de proliferação celular (p<0,0000). Conclusão: A uremia induzida pelo modelo de nefrectomia 5/6 determina impacto negativo no processo de cicatrização colônico.

ABSTRACT Background: Chronic kidney disease affects more than 500 million people worldwide. In this context, the uremic toxins present are related to worsening in tissue healing. Aim: Evaluate on healing of colonic anastomosis in uremic rats, serum and anatomopathological indicators, which may be related to the change tissue repair process. Methods: Twenty Wistar rats, were randomly separated into two groups. In the sham group they were submitted to 5/6 nephrectomy simulation in left kidney, simulation right nephrectomy, median laparotomy, colotomy and colorraphy. In the uremia group, they were submitted to 5/6 nephrectomy of the left kidney, total nephrectomy of the right kidney and median laparotomy, colotomy and colorraphy. Were collected for serum urea, creatinine and CRP dosages and the colonic segments were studied for evaluation of granulation tissue, collagen maturation, microvascular and myofibroblasts density, and cell viability. Through histochemical processing, microvascular density was evaluated by anti-CD34 monoclonal antibody marking, cell viability by cell proliferation nuclear antigen screening and myofibroblasts density with monoclonal anti-α-actin antibody. Computerized histometry was used for evaluations of collagens type I and III by the coloration of picrosirius. Results: The group submitted to nephrectomy 5/6, compared to the sham group, show urea increase (p<0.0000) and higher C reactive protein (p=0.0142). Decrease of granulation tissue formation (border reepithelialization p=0,0196, angiofibroblast proliferation p=0.0379), mean collagen I (p=0,0009) and collagen III (p=0,016), microvascular density (p=0,0074), cell proliferation nuclear antigen (p<0,0000) and myofibroblasts (p<0,0001). Conclusion: The uremia induced by nephrectomy 5/6 model establishes negative impact in the colonic wound healing.

ABSTRACT PURPOSE: To compare the two lines suture (total and seromuscular) after partial gastrectomy in normal and overweight rats. METHODS: Forty Wistar rats were distributed in two groups. Group A received normal diet; group B, normal diet and supplementation with saccharose in the water. When group B progressed to a statistically greater weight than the animals of group A, the experiment (sleeve-like gastrectomy) was conducted with gastrorraphy in two sutures lines (total and seromuscular).The animals were distributed into two subgroups of 10. A1 and A2 subgroups were sacrificed at 7 and 14 days postoperatively as well as B1 and B2. Mortality, morbidity, complications attributed to the gastric suture, biochemical dosages, Lee index, macroscopy, weight of retroperitoneal and gonadal fat, optical microscopy with hematoxylin-eosin and picrosirius-red, were the evaluation parameters. RESULTS: The overweight group achieved statistically greater weight after 16 weeks in induced obesity; there was no mortality or complications with clinical consequences attributable to morbidity. The overweight group had statistically greater weight of gonadal and retroperitoneal fat. The difference was observed in urea, albumin, total cholesterol and indirect bilirubin. CONCLUSION: There was no outcome difference between the overweight and non-overweight group in two suture lines in gastrorrhaphy after sleeve-like gastrectomy.

PurposeTo evaluate the synthesis of type I (mature) and type III (immature) collagen in bladder suture of rats treated with a combination of tacrolimus and mycophenolate mofetil for 15 days.Materials and MethodsThirty rats were divided into 3 groups: the sham, control and experimental groups. All the animals underwent laparotomy, cystotomy and bladder suture in two planes with surgical PDS 5-0 thread. The sham group did not receive treatment. The control group received saline solution, and the experimental group received 0.1mg/kg/day of tacrolimus with 20mg/kg/day of mycophenolate mofetil, for 15 days. From then on, the tacrolimus was dosed. The surgical specimens of the bladder suture area were processed so that the total type I and type III collagen could be measured by the picrosirius red technique.ResultsThere was a predominance of type I collagen production in the sham and control groups compared to the experimental group, in which type III collagen was predominant. The production of total collagen did not change.ConclusionThe association of tacrolimus and mycophenolate mofetil in animals qualitatively changes the production of collagen after 15 days with a predominance of type III collagen.

OBJETIVO: Comparar o crescimento bacteriano em colostro puro e colostro com aditivo do leite materno contendo ferro. MÉTODOS: Foram comparadas 78 amostras de colostro puro ou colostro com adição de aditivo do leite materno contendo ferro para avaliar o crescimento de Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa. Para a análise qualitativa, discos de papel-filtro foram imersos em amostras de cada grupo e incubados por 48 horas com 10¹ Unidades Formadoras de Colônias/mL de cada cepa. Para a avaliação quantitativa, 1 mL de cada cepa contendo 10(7) Unidades Formadoras de Colônias/mL foi homogeneizado com 1 mL, tanto de colostro puro quanto de colostro com aditivo do leite materno, espalhado em placa de Petri e incubado a 37ºC. O número de Unidades Formadoras de Colônias foi contado 24 horas depois. RESULTADOS: A análise qualitativa não mostrou nenhuma diferença no crescimento bacteriano. Na avaliação quantitativa, o crescimento de Escherichia coli (EC) no grupo C foi de 29,4±9,7 x 10(6) CFU/mL, enquanto no grupo FM85 foi de 31,2±10,8 x 10(6) CFU/mL. A diferença entre o crescimento médio foi de 1,9±4,9 x 10(6) CFU/mL (p = 0,001). Não houve diferenças no crescimento de Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa. CONCLUSÃO: A adição de ferro a essa concentração reduz a ação bacteriostática do leite materno contra Escherichia coli.

OBJECTIVE: To compare bacterial growth in pure colostrum versus colostrum with human milk fortifier (HMF) containing iron. METHODS: The growth of Escherichia coli, Staphylococcus aureus, and Pseudomonas aeruginosa in 78 samples of pure colostrum or colostrum with added iron-containing HMF was compared. For qualitative analysis, filter paper discs were immersed in samples from each group and incubated for 48 hours with 10¹ colony forming units (CFUs)/mL of each strain. For quantitative assessment, 1 mL of each strain containing 10(7) CFUs/mL was homogenized with 1 mL of either colostrum or colostrum with human milk fortifier, seeded into a Petri dish, and incubated at 37ºC. Twenty-four hours later, the number of CFUs was counted. RESULTS: The qualitative analysis showed no difference in bacterial growth. In the quantitative evaluation, E. coli growth in the control group was 29.4±9.7 x 10(6) CFU/ mL, while in the HMF group it was 31.2±10.8 x 10(6) CFU/mL. The difference between the average growth was 1.9±4.9 x 10(6) CFU/mL (p = 0.001). There were no differences in S. aureus and P. aeruginosa growth. CONCLUSION: Addition of iron at this concentration reduces breast milk bacteriostatic action against E. coli.

OBJETIVO: Avaliar se o tratamento com L-arginina influencia a cicatrização de retalhos cutâneos em ratos expostos à nicotina. MÉTODOS: Foram utilizados 40 ratos Wistar pesando 142,4±10,1g separados em quatro grupos: GC- tratamento com solução tampão fosfatos pH 7,4, confecção de retalho cutâneo, observação por 10 dias; GN- exposição à nicotina por quatro semanas, confecção de retalho cutâneo, observação por dez dias; GA- tratamento com solução tampão fosfatos pH 7,4 por quatro semanas, confecção de retalho cutâneo, tratamento com arginina por dez dias; GAN- exposição à nicotina por quatro semanas, confecção de retalho cutâneo, tratamento com arginina por dez dias. Foram avaliadas as áreas de necrose, re-epitelização, reação inflamatória e formação de tecido de granulação, pela coloração HE, a área de deposição total e a diferenciação de colágenos I e III por histometria com a coloração de picrosirius, e, através da marcação imunoistoquímica com anticorpo monoclonal anti-CD34, a densidade vascular cicatricial. RESULTADOS: As porcentagens de áreas de necrose de GN e GNA foram maiores (p<0,001) do que GC e GA. Nos escores histológicos, a deposição de colágeno e a porcentagem de colágeno tipo I, no GC e GA foram similares (p>0,05) e maiores (p<0,001) do que em GA e em GNA e, nas densidades vasculares, GN e GAN foram menores (p<0,001) do que em GC e em GA. CONCLUSÃO: A exposição à nicotina inibiu os efeitos da arginina, e nos ratos não expostos, induziu melhora na angiogênese e na deposição de colágeno total nos retalhos cutâneos.

OBJECTIVE: To evaluate whether treatment with L-arginine influences the healing of skin flaps in rats exposed to nicotine. METHODS: 40 male Wistar rats weighing 142.4 ± 10.1 g were separated into four groups: GC: treatment with 7.4 pH phosphate buffer, submitted to skin flap and observation for ten days; GN: exposure to nicotine for four weeks, submitted to skin flap and observation for ten days; GA: treatment with 7.4 pH phosphate buffer for four weeks, submitted to skin flap and arginine treatment for ten days; GAN: exposure to nicotine for four weeks, submitted to skin flap and treatment with arginine for ten days. We evaluated: areas of necrosis, re-epithelialization, inflammatory reaction and formation of granulation tissue by HE stain; the total area of deposition and differentiation of collagens I and III by histometry with picrosirius staining; and the scar vascular density by immunohistochemical staining with monoclonal anti-CD34 antibodies. RESULTS: The percentages of necrotic areas in GN and GNA were higher (p <0.001) than in GC and GA. In histological scores, collagen deposition, and the percentage of type I collagen, GA and GC were similar to each other (p> 0.05), but higher (p <0.001) than GA and GNA; as for vascular densities, they were lower in GN and GAN (p <0.001) than in GC and GA. CONCLUSION: Exposure to nicotine inhibited the effects of arginine and in unexposed mice there was induction of angiogenesis and improvement in the total collagen deposition in the skin flaps.

OBJETIVO: Comparar a sutura com fio de polipropileno e poliglecaprone 25 após cecotomia parcial em ratos. MÉTODOS: Trinta e seis ratos foram distribuídos em dois grupos A e B de 18 animais, e cada grupo foi dividido em três subgrupos de seis, sacrificados no 4º, 7º e 14º dias do pós-operatório. Estudou-se a mortalidade, morbidade, complicações atribuíveis às suturas, macroscopia, microscopia ótica e dosagem de hidroxiprolina no nível da sutura. RESULTADOS: Não houve mortalidade ou complicações da ferida operatória como hematoma, seroma, abscesso, evisceração ou eventração. Na avaliação microscópica os critérios de re-epitelização, coaptação e processo inflamatório ambos os grupos não apresentaram diferença significativa. A taxa tecidual média da hidroxiprolina encontrada nas amostras no 4º dia de pós-operatório foi de 21,38 mg/g de tecido para o grupo A e 16,68 mg/g para o grupo B; no 7º dia a média foi de 15,64 mg/g de tecido para o grupo A e 26,53 mg/g para o grupo B; no 14º dia ela foi de 8,09 mg/g de tecido para o grupo A e 25,07 mg/g para o grupo B. CONCLUSÃO: Não houve diferença estatística entre a evolução clínica, avaliação macroscópica, microscopia e dosagem de hidroxiprolina entre as suturas realizadas com os fios estudados.

PURPOSE: To compare sutures with polypropylene and poliglecaprone 25 after partial cecotomy in rats. METHODS: Thirty six rats divided into two groups, A and B, of 18 animals; each group was also divided into three subgroups of six animals sacrificed at 4th, 7th and 14th days after surgery. Were studied the mortality, morbidity, complications attributable to sutures, macroscopy, optical microscopy and measurement of hydroxyproline at the level of the suture. RESULTS: There were no deaths or wound complications such as hematoma, seroma, abscess, evisceration or eventration. On microscopic evaluation reepithelization, coaptation and inflammation in both groups did not differ significantly. The average rate of tissue hydroxyproline found in the samples on the 4th day after surgery, was 21.38 mg/g tissue for group A and 16.68 mg/g for group B; on day 7 after surgery, the average was 15.64 mg/g tissue for group A and 26.53 mg/g for group B; on day 14, the average was 8.09 mg/g tissue for group A and 25.07 mg/g for group B. CONCLUSION: There were no differences on clinical evolution, macroscopic aspect, microscopic data and hydroxyproline concentration on both sutures.

OBJETIVO: verificar se o tacrolimus administrado em ratos, em vigência de pancreatite induzida pela L-Arginina, interfere nos níveis séricos da amilase e glicose e no padrão histológico do parênquima pancreático. MÉTODOS: quarenta ratos Wistar foram distribuídos em quatro grupos com 10 ratos cada. Grupo controle (C), grupo tacrolimus (T), grupo pancreatite (P) e grupo pancreatite-tacrolimus (PT). Foram avaliados os níveis séricos de amilase, glicose e tacrolimus e feitas avaliações histológicas do pâncreas, A indução de pancreatite foi feita pela inoculação de L-Arginina na dose de 500mg/100g de peso corporal por via intraperitoneal e o tratamento com tacrolimus na dose de 1ìg/kg por via subcutânea durante quatro dias. RESULTADOS: a amilasemia estava mais elevada (p=0,0000) nos grupos PT, T e P do que no grupo controle. A média do grupo PT foi maior (p=0,0009) que a do grupo T, mas não diferiu (p=0,6802) da média do grupo P. Entre os grupos P e T não houve diferença (p=0,2568). Não houve diferença nas médias de glicemia entre os grupos (p=0,4920) e os níveis séricos de tacrolimus foram similares nos grupos PT e T (p=0,7112). Não ocorreram alterações histológicas nos grupos T e C e não ocorreu hemorragia no pâncreas dos ratos dos grupos P e PT. No grupo P, em 30% não se observou edema, em 20% observou-se a forma leve e em 50%, a moderada; quanto à infiltração inflamatória, em 80% moderada e em 20% não ocorreu, e a atrofia do parênquima foi de 60% moderada e 40% acentuada. No grupo PT, houve ocorrência de edema, infiltração inflamatória e atrofia do pâncreas em todos os ratos. CONCLUSÃO: o tratamento pelo tacrolimus induziu aumento nos níveis séricos de amilase em ratos normais, não alterou a glicemia nem o padrão histológico do parênquima pancreático. Na vigência de pancreatite induzida pela L-Arginina o tacrolimus induziu edema, infiltração inflamatória e atrofia com maior gravidade no parênquima pancreático.

OBJECTIVE: To determine whether tacrolimus administered to rats, in the presence of pancreatitis induced by L-Arginine, interferes with the serum levels of amylase and glucose and the histological pattern of the pancreatic parenchyma. METHODS: Forty Wistar rats were divided into four groups with 10 rats each: control group (C), tacrolimus group (T), pancreatitis group (P) and pancreatitis-tacrolimus group (PT). We evaluated serum levels of amylase, glucose, and tacrolimus and made histological assessments of the pancreas. Induction of pancreatitis was made by inoculation of L-Arginine at a dose of 500mg/100g body weight intraperitoneally, and tacrolimus treatment at a dose of 1ìg/kg subcutaneously for four days. RESULTS: Serum amylase was higher (p = 0.0000) in groups PT, P and T than in the control group. The PT group mean was higher (p = 0.0009) than in the T group, but did not differ (p = 0.6802) from the average of the P group. There was no difference between groups P and T (p = 0.2568). Neither in mean blood glucose between the groups (p = 0.4920); serum levels of tacrolimus were similar in PT and T groups (p = 0.7112). There were no histological changes in groups T and C and no hemorrhage in the pancreas of rats in groups P and PT. In group P, there was no edema in 30%, mild edema in 20% and in 50%, moderate; as for inflammatory infiltration, it was moderate in 80% and absent in 20%, and atrophy of the parenchyma was moderate in 60% and severe in 40%. In the PT group, there was edema, inflammatory infiltration or atrophy in the pancreas in all rats. CONCLUSION: Treatment with Tacrolimus induced an increase in serum amylase in normal mice, but did not affect blood glucose or the histological pattern of the pancreatic parenchyma. In the presence of pancreatitis induced by L-Arginine tacrolimus induced edema, inflammatory infiltration and more severe atrophy in the pancreatic parenchyma.

RACIONAL: A videocirurgia pode apresentar complicações inerentes ao método e dentre elas destacam-se as relacionadas ao aumento da pressão na cavidade intra-abdominal. OBJETIVO: Analisar os efeitos do pneumoperitônio em modelo experimental de endotoxemia causada por lipopolissacarídeo. MÉTODO: Foram utilizados 32 ratos Wistar dos quais foi coletado sangue 24 horas prévias para obtenção dos valores de referência nas provas de função renal, hepática e do estado endotóxico (contagens total e diferencial de leucócitos, contagem de plaquetas e dosagens de lipopolissacarídeo, TNFα, IL6). A seguir os ratos foram separados em quatro grupos com oito: grupos controle inoculados com lipopolissacarídeo (10 mg/kg via intraperitoneal) e mantidos por quatro e 11 horas (C-LPS4 e C-LPS11). Grupo C-PP, submetido ao pneumoperitônio por CO2 por uma hora e mantido sob observação por seis horas. Grupo experimento (E) inoculados com 10 mg/kg de lipopolissacarídeo por via intraperitoneal, após quatro horas submetidos ao pneumoperitônio por CO2 por uma hora e mantidos sob observação por seis horas. Ao término destes períodos foram coletadas amostras de sangue para as mesmas avaliações iniciais. Utilizou-se o método de T-Student para as comparações dos resultados, com nível de significância de 0,05. RESULTADOS: Em comparação aos valores iniciais e aos grupos controle, o grupo E apresentou maiores valores nas dosagens de creatinina e uréia, bilirrubina direta, ALT e TAP, aumento nas dosagens de IL6, TNFα e diminuição de plaquetas, aumento de leucócitos e bastonetes e detecção de endotoxina circulante. CONCLUSÃO: O pneumoperitônio por dióxido de carbono induz aumentos na liberação de TNFα, IL6, piora das funções hepática e renal em modelo experimental de endotoxemia induzida por lipopolissacarídeo.

BACKGROUND: Videosurgery can bring complications with it´s manipulation and among them the hyperpression into the abdominal cavity is important factor. AIM: To analyze the pneumoperitoneum effects in an endotoxemia experimental model caused by lipopolyssacharide. METHOD: Thirty-two Wistar rats were utilized, from which blood was collected 24 hours prior to the experiment for the initial evaluations of the renal function, the hepatic function and the endotoxic state (total counts and differential of leukocytes, platelet count and dosages of lipopolyssacharide, TNFα, IL6). The rats were then separated into four groups of eight: control groups inoculated with lipopolyssacharide (10 mg/kg via intraperitoneum) and kept for four and 11 hours (C-LPS4 and C-LPS11). Group C-PP, control of pneumoperitoneum by carbon dioxide at 10 mmHg for one hour and kept under observation for six hours. Experiment group (E) in which the rats were inoculated with 10 mg/kg of lipopolyssacharide via intraperitoneum and after four hours were submitted to pneumoperitoneum by carbon dioxide at 10 mmHg for one hour and kept under observation for six hours. At the end of these periods, blood samples were collected for the same initial evaluations. The T-student method was utilized for statistical comparisons of results, with a significance level of 0.05. RESULTS: Compared to the initial values and the control groups, Group E had higher values in the renal function tests (creatinine=0.85 ± 0.24 and urea=106.38 ± 37.61 mg/dL). In the hepatic function tests, there were higher values in the dosages of direct bilirubin (0.34 ± 0.09mg/dL), ALT (390,38 ± 351.88) and TAP (17.01 ± 2.18). The endotoxic state was confirmed by the dosages of IL6 (36.0 ± 11.23 pg/mL), TNFα (518.36 ± 203.39 pg/mL) and by the hematological alterations: reduction of platelets, increased leukocytes and band neutrophils and the detection of circulating endotoxin (0.21 ± 0.08 UE/mL). CONCLUSION: Pneumoperitoneum by carbon dioxide induces increase of TNFα, IL6, worsens the hepatic and renal function in the experimental endotoxemia model induced by lipopolyssacharide.

OBJETIVO: Estudar a densidade de colágeno e a população de fibroblastos em feridas cutâneas de ratos sob a influência da nicotina. MÉTODOS: Analisaram-se as cicatrizes de feridas abdominais de ratos. Foi administrada 2 mg/kg/d de nicotina, por via subcutânea aos animais do grupo experimento e a solução usada como veículo para os animais do grupo controle. O tratamento foi iniciado sete dias antes do ato operatório e mantido por sete ou quatorze dias no pós-operatório. As cicatrizes ressecadas foram preparadas para estudo histo-patológico. Cortes histológicos foram corados pelo Sirius Supra red F3BA para a análise do colágeno e submetidos à exame pela técnica imuno-histoquímica permitiram reconhecer a população de fibroblastos. RESULTADOS: Verificou-se que não existiu diferença significante na densidade de colágeno tipo I, na avaliação feita com sete dias (p=0,912) e com 14 dias (p=0,211). O grupo controle mostrava mais colágeno tipo III com sete dias (p=0,004), mas aos 14 dias não havia diferença significante (p=0,720). A quantificação do colágeno total, embora fosse maior no grupo controle, não o foi de forma significante em nenhum dos tempos estudados (p=0,103 aos sete dias e p=0,549 aos 14 dias). A média de fibroblastos por campo esteve diminuída na avaliação de sete dias (p=0,0001) e na de quatorze dias (p=0,0000). CONCLUSÃO: Nas condições do experimento, a nicotina promoveu diminuição da população de fibroblastos sem modificar a densidade do colágeno de forma significante.

PURPOSE: To study the collagen density and the population of fibroblasts in cutaneous injuries in rats under the influence of nicotine. METHODS: The scars of abdominal wounds in rats were analyzed. 2 mg/kg/d of nicotine was administered to the animals in the experiment group and the solution used as a vehicle for the animals in the control group. Treatment was begun seven days prior to surgery and maintained for seven or fourteen days following surgery. The removed scars were prepared for histopathological study. Histological cuts were stained by Sirius Supra red F3BA for collagen analysis and submitted to the examination using the immunohistochemical technique, which enabled us to recognize the population of fibroblasts. RESULTS: No significant difference was found in type I collagen density after seven days (p=0.912), nor after fourteen days (p=0.211). The control group had more type III collagen after seven days (p=0.004), but after fourteen days there was no significant difference (p=0,720). The total quantification of collagen, although higher in the control group, was not significantly so at any time during the study (p=0.103 after seven days and p=0.549 after fourteen days). The average of fibroblasts per field was lower after seven days (p=0.0001) and after fourteen days (p=0.0000). CONCLUSION: Under the conditions of this experiment, nicotine reduced the fibroblast population without modifying collagen density significantly.

OBJETIVO: Estudar a reação inflamatória e a deposição de colágeno na cicatrização de feridas cutâneas sob a influência da nicotina. MÉTODOS: Analisaram-se as cicatrizes de feridas abdominais de ratos tratados com nicotina, 2 mg/kg/d, comparando-as às de ratos controle. O tratamento foi iniciado sete dias antes do ato operatório e mantido por sete ou 14 dias, no pós-operatório. Os cortes histológicos foram corados pela hematoxilina e eosina e neles por meio de escores estabelecidos, reconheceu-se a intensidade e o tipo da reação inflamatória. Cortes histológicos corados pelo Sirius Supra red F3BA permitiram reconhecer a densidade do colágeno. RESULTADOS: Não houve diferença quanto à intensidade da reação inflamatória na análise de sete dias (p=0,165) e nem na de 14 dias (p=0,684). Pôde-se verificar que não existiu diferença significante na densidade de colágeno tipo I, na avaliação feita com sete dias (p=0,912) e com 14 dias (p=0,211). O grupo controle mostrava mais colágeno tipo III com sete dias (p=0,004), mas aos 14 não havia diferença significante (p=0,720). A quantificação do colágeno total, embora fosse maior no grupo controle, não o foi de forma significante em nenhum dos tempos estudados (p=0,103 aos sete e p=0,549 aos 14 dias). CONCLUSÃO: Não houve, nas cicatrizes dos animais tratados com nicotina, em relação aos controles, diferença quanto à intensidade do processo inflamatório, nem quanto à densidade do colágeno.

OBJECTIVE: To study the inflammatory reaction and deposition of collagen in the healing of cutaneous injuries under the influence of nicotine. METHODS: The scars of abdominal injuries in rats were analyzed, which had been treated with nicotine, 2 mg/kg/d, and compared with those of control rats. Treatment was begun seven days prior to operation and was maintained for seven or fourteen days after surgery. The histological cuts were stained with hematoxylin and eosin and through the established scores the intensity and type of inflammatory reaction was identified. Histological cuts stained by Sirius Supra red F3BA enabled the identification of the collagen density. RESULTS: There was no difference in intensity of the inflammatory reaction after seven days (p=0.165), nor after fourteen days (p=0.684). There was no significant difference in the type I collagen density in the evaluation carried out after seven days (p=0.912) and after fourteen days (p=0,211). The control group had more type III collagen after seven days (p=0.004), but after fourteen days there was no significant difference (p=0.720). Although the total quantification of collagen was higher in the control group, there was no significant difference at any time during this study (p=0.103 after seven days and p=0.549 after fourteen days). CONCLUSION: In the scars of the animals treated with nicotine in comparison with the control group, there was no difference in the intensity of the inflammatory process, nor in collagen density.

RACIONAL: Doses excessivas de aminoácidos básicos como a L-arginina têm a capacidade de lesar o pâncreas de ratos. OBJETIVO: Descrever e avaliar as características bioquímicas e histológicas da pancreatite aguda induzida pela L-arginina em ratos durante a instalação, desenvolvimento e reparação do processo inflamatório pancreático. MATERIAL E MÉTODOS: A amostra constituiu-se de 105 ratos machos, da linhagem Wistar. Aos ratos do grupo experimento (n = 70) administrou-se injeção intraperitonial de 500 mg/100 g de peso corporal de L-arginina. No grupo controle (n = 35) foi injetada solução salina isotônica. Analisaram-se 10 animais do grupo experimento e 5 do grupo controle em cada período de 6 h, 12 h, 24 h, 48 h, 72 h, 7 dias e 14 dias. Durante os tempos determinados coletou-se sangue para exames laboratoriais e o pâncreas para análise em microscopia óptica. RESULTADOS: Doze a 24 horas após a injeção de L-arginina os níveis séricos de amilase atingiram valores máximos, comparados àqueles dos ratos controle, decrescendo gradualmente, alcançou-os na 48ªhora sendo significativamente menor após 72 horas e 7 dias. A atividade enzimática retornou a níveis basais após 14 dias. Os valores de amilase estavam normais em todos os tempos avaliados nos animais do grupo controle. Na microscopia óptica, após injeção de L-arginina, observou-se arquitetura pancreática histologicamente preservada no período de 6 horas, evidenciando-se em 24 horas importante edema intersticial. Após 48 horas, a arquitetura acinar estava parcialmente destruída com necrose celular focal, atingindo sua máxima severidade ao ultrapassar 72 horas. No 7º dia a necrose tecidual e o edema haviam diminuído, iniciando-se a regeneração da arquitetura acinar. Observou-se a reconstrução estrutural pancreática após 14 dias. No grupo controle não se encontraram alterações histológicas pancreáticas. CONCLUSÃO: A pancreatite aguda experimental induzida pela L-arginina induz a necrose pancreática, apresentando evolução auto-limitada com regeneração do pâncreas em 2 semanas.

BACKGROUND: Excessive doses of basic amino acids such as L-arginine are able to injure the pancreas of rats. AIM: To describe and evaluate the biochemical and histological characteristics of acute pancreatitis in rats induced by L-arginine during the installation, development and repair stages of the pancreatic inflammatory process. MATERIAL AND METHODS - The study group consisted of 105 male Wistar rats. The rats in the experimental group (n = 70) received 500 mg/100 g of corporal weight L-arginine injection intraperitoneally. In the control group (n = 35), isotonic saline solution was injected. Ten rats in the experiment group and five in the control group were analyzed after 6, 12, 24, 48, and 72 hours, on the 7th and 14th days. During those times, blood samples were collected for laboratory testing and samples from the pancreas were collected for an optical microscopy analysis. RESULTS: From 12 to 24 hours after the injection of L-arginine, the amylase serum levels raised to their peak values when compared to the rats in the control group, decreasing gradually, reaching an equal level after the 48th hour and being significantly lower after 72 hours and 7 days. The enzymatic activity returned to its basal level after 14 days. The amylase values were normal in all the times evaluated in the control group. In optical microscopy, after the injection of L-arginine, a pancreatic architecture histologically preserved was observed after 6 hours, evidencing an important interstitial edema in 24 hours. After 48 hours, the acinar architecture was partially destroyed with focal cellular necrosis, reaching its maximum severity after 72 hours. On the 7th, the tissue necrosis and the edema had diminished, and the regeneration of the acinar architecture initiated. The pancreatic structural reconstruction could be observed after 14 days. Pancreatic histological changes were not found in the control group. CONCLUSION: - Experimental acute pancreatitis induced by L-arginine leads to pancreatic necrosis showing self-limited evolution with pancreas regeneration in 2 weeks.

Descrição de um modelo experimental de artrite séptica por inoculação monobacteriana de Staphylococcus aureus na veia dorsal do pênis de ratos Wistar.

An experimental model of septic arthritis by monobacterial inoculation of Staphylococcus aureus 10.9 in Wistar rats dorsal penis vein is describred.

OBJETIVO: O transplante de hepatócitos xenogênicos encapsulados pode ser utilizado no futuro em situações como a insuficiência hepática fulminante. Porém, observa-se perda precoce da expressão de genes hepatocitários específicos em hepatócitos humanos. O objetivo deste estudo é avaliar a influência da resposta imunológica na perda da expressão genética hepatocitária de hepatócitos humanos encapsulados e transplantados em ratos. MÉTODO: Hepatócitos humanos foram isolados de fragmentos hepáticos, encapsulados em fibras e transplantados em ratos. Nos dias 3, 7 e 14 após o transplante as fibras foram coletadas e avaliadas a morfologia por microscopia óptica e eletrônica, e a expressão dos genes por biologia molecular. O ARNm da albumina humana foi quantificado por RT-PCR e Northern blot. A resposta imunológica contra os hepatócitos foi avaliada através do ADN hepatocitário na busca de apoptose do núcleo celular e pelo aumento da expressão do CMH de classe I. RESULTADOS: Os aspectos morfológicos dos hepatócitos mantiveram-se normais até o sétimo dia após o transplante. Não se observaram células envolvidas com resposta imunológica do receptor nas fibras. Os transcritos da albumina foram detectados até D-14. Entre os dias 3 e 7 estavam em 30% em relação ao dia 0. A análise do ADN mostrou bandas preservadas sem a presença de fenômenos de apoptose nos diferentes dias. Não ocorreu aumento da expressão do CMH de classe I. CONCLUSÕES: Hepatócitos humanos encapsulados e transplantados em ratos permanecem viáveis apesar da diminuição da expressão de determinados genes. Este fenômeno, não se deve à resposta imunológica do receptor, mas ao próprio processo de isolamento celular.

BACKGROUND: Xenogeneic hepatocytes encapsulated in semipermeable membranes could be used in the future; however, encapsulated human hepatocytes presented an early decrease of hepatocyte gene expression. The objective of this study is to investigate the immunological consequences of intraperitoneal implantation of encapsulated xenogeneic hepatocytes on gene expression. METHODS: human hepatocytes were encapsulated in hollow fibers and transplanted in the peritoneal cavity of rats. The fibers were explanted for analysis at days D3, D7 and D14 following transplantation. Morphological features under light and electron microscopies and gene expression were compared to those of non-transplanted encapsulated hepatocytes. Human albumin mRNAs were quantified by RT-PCR and Northern blot. Immunological activity against human hepatocytes was assessed by the analysis of DNA searching for nucleolar apoptosis and also by the rise on MHC class I expression. RESULTS: Transplanted hepatocytes were more than 60% viables and exhibited morphological criteria of hepatocytic differentiation up to D7. At no time cells involved with the immunological response were observed inside the fibers. Albumin transcripts were also detected up to D14. At D3 and D7, albumin mRNA levels were of 30 %, compared to control. The DNA analysis showed well preserved bands with no apoptosis at any time of evaluation. There was no rise on MHC class I expression. CONCLUSION: Human hepatocytes remain viable following encapsulation and intraperitoneal transplantation in rats. Although there is a decrease in gene expression this is not due to a host response against those cells. It seems that this effect is rather related to the process of hepatocyte isolation itself.